p24抗原是HIV-1的核衣壳蛋白,p24抗原的检测可以提高检测灵敏度和缩短检测“窗口期”。但p24抗原检测试剂与HIV病毒RNA检测试剂相比,检测灵敏度还相差几千倍。
本成果以HIVp24抗原为检测目标,采用荧光显微放大,单颗纳米自动计数和免疫层析试纸相结合,研究和构建了一种超灵敏的量子点荧光单分子免疫快速检测方法,提高低丰度血清标志物的检测灵敏度。该方法通过消除纳米探针与层析膜的非特异结合、制备高信噪比量子点荧光微球、构建3D打印和收集相结合的便携式荧光显微分析系统,实现对HIVp24抗原的快速、超灵敏、现场检测。
该项目成果可提高现有荧光免疫层析的检测灵敏度10-100倍以上,并且无需复杂的仪器和操作步骤,检测时间短,能够满足快速诊断(Point-of-CareTest,POCT)的低成本、操作简便、便携性的要求。因此本成果可以有效克服目前HIV病毒检测技术存在的成
本高昂和检测时间较长的问题,对于艾滋病的预防和控制具有重要的社会意义。
项目创新性地提出在荧光免疫层析试纸上进行单分子免疫检测,通过合成高性能量子点荧光纳米探针、荧光显微信号放大和单纳米颗粒计数的检测方法,构建现场、快速超灵敏的数字免疫层析检测新方法。
现有的单分子免疫技术基于芯片分离和免疫磁珠化学发光技术,尽管具有较高的检测灵敏度,但需要超高灵敏的光学传感器和昂贵的检测芯片,单人份试剂成本较高。
本项目创新性地提出基于免疫层析的POCT单分子免疫检测技术,基于高灵敏荧光颗粒、以及免疫层析技术的快速、低成本等特点,填补国内外在POCT单分子免疫检测技术的空白,具有较高的临床转化前景。