一种基于荧光法的甲胎蛋白检测试剂盒及其制备

成果编号：25770

价格：面议

完成单位：南京中医药大学

单位类别：其他高校

完成时间：2020年

成熟程度：研制阶段

服务产业领域：生物技术与医药

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发布人：朱栋离线

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本发明属于生物技术及临床医学诊断领域，涉及一种基于荧光CdTe量子点复合多孔ZnS纳米微球(ZnS-CdTe)的甲胎蛋白检测试剂盒及其制备，从而实现对癌症肿瘤疾病的早期诊断。过去的几十年里，许多AFP检测技术建立了起来，目前检测AFP的方法主要有放射免疫分析法和酶联免疫法(ELISA)，各有优缺点，适用范围上也各有不同。ELISA法的灵敏度较低，而且耗力耗时，操作复杂，已经很难满足快速定量检测的要求。放射免疫分析法有时会出现交叉反应、假阳性反应、组织样品处理不够迅速、不能灭活降解酶、盐及pH有时会影响结果等缺点。基于ZnS-CdTe纳米微球荧光法的基本原理是，首先将捕获抗体(抗体1)吸附在96孔板上，然后捕获检测目标抗原-甲胎蛋白，标记有ZnS-CdTe纳米微球的检测抗体与目标抗原相遇时，抗原抗体结合而使得ZnS-CdTe纳米微球聚集在96孔板内，通过荧光强度检测其抗原-甲胎蛋白的浓度。

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成果介绍

科技计划：

成果形式：新产品、其他

合作方式：技术转让、技术开发、技术服务、其他

参与活动： 2020年高校院所走进镇江高新区暨船舶海工产业产学研合作对接活动 2020年高校院所服务苏北五市产学研合作对接活动

专利情况：正在申请 ,其中:发明专利 0 项
已授权专利,其中:发明专利 1 项

成果简介

成果概况

创新要点

本发明研究表明，许多纳米颗粒此范围之内并不满足试验的要求，单纯的CdTe量子点粒径小、联接的抗体有限，无法满足临床中对灵敏度小于1ng/mL的要求，和最低检测限5ng/mL的要求，且线性范围不覆盖临床中正常生理和病理情况的浓度区间，因此常常造成假阴性的结果；同时还存在反应时间长(平衡时间10-30min)，无法达到快速检验的要求。为了克服上述现有技术的不足，解决现有技术中存在的上述缺陷，本发明提供一种基于荧光ZnS-CdTe纳米微球的甲胎蛋白检测试剂盒及其制备方法。该试剂盒线性范围宽、灵敏度高，制造成本低，反应后不产生沉淀，方便生化仪清洗。

主要技术指标

一种基于荧光CdTe量子点复合多孔ZnS纳米微球(ZnS-CdTe)的甲胎蛋白检测试剂盒，该试剂盒包括试剂R2，所述试剂R2为含有标记了甲胎蛋白抗体的ZnS-CdTe纳米颗粒的溶液，所述ZnS纳米颗粒的粒径为50～200nm，所述CdTe量子点颗粒的粒径为5～10nm，所述ZnS-CdTe纳米颗粒和抗体质量比在100∶(10～60)。所述试剂R2还含有促凝剂、稳定剂、蔗糖和甘油，其中，促凝剂为重量体积比0.1～0.3％的聚乙二醇(PEG8000)，稳定剂为重量体积比为0.2～1％的牛血清白蛋白(BSA)，蔗糖的重量体积比为5～10％，甘油的重量体积比为5～10％。更进一步地，所述荧光CdTe量子点复合多孔ZnS纳米微球(ZnS-CdTe)的甲胎蛋白检测试剂盒还包括起缓冲、稳定、捕获目标抗原-甲胎蛋白作用的试剂R1，所述试剂R1为含有体积比1-8μg/mL的捕获抗体、重量体积比0.1％的NaN3和重量体积比0.05％Tween20的，pH9.6的碳酸钠盐缓冲液。在本发明的试剂盒中，发明创新点主要在试剂R2，试剂R1也可以使用现有酶联免疫法(ELISA)的试剂R1。

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