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可拉酸高产菌株构建与发酵

成果编号:38763
价格:面议
完成单位:江南大学
单位类别:211系统院所
完成时间:2022年
成熟程度:小批量生产阶段
服务产业领域: 生物技术与医药、新材料
发布人:王小元 离线
大肠杆菌胞外存在复杂且种类繁多的非必需细胞膜壁结构,这些结构对细菌的正常生理活动至关重要。但是,在工业领域中,这些非必需细胞膜壁结构不仅在合成过程中耗费大量的能源和底物,而且某些细胞膜壁结构还存在巨大的致病风险。本论文整理汇总了11种非必需细胞膜壁结构,分别是:菌毛、鞭毛、卷曲纤维、核心多糖、O-抗原、克拉酸、肠杆菌共同抗原、4型荚膜、纤维素、唾液酸和聚-β-1,6-N-乙酰葡萄糖胺。本研究从基因水平去除这些大分子结构,构建了一系列非必需细胞膜壁结构缺失的突变菌株。从生长、底物和能量节约、通透性和代谢物变化等角度,筛选有益于工业化生产的突变株,解析其全局调控机制,并将其应用于3-羟基丁酸酯(PHB)、L-苏氨酸、重组蛋白和克拉酸的生产。
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成果介绍

科技计划: 国家级: 省部级:
成果形式:新技术、新工艺、新产品、其他
合作方式:技术转让、技术开发、其他
参与活动: 第二届江苏产学研合作对接大会 2023年高校院所服务苏北五市产学研合作对接活动
专利情况: 正在申请 ,其中:发明专利 2
已授权专利,其中:发明专利 5
成果简介
成果概况
大肠杆菌胞外存在复杂且种类繁多的非必需细胞膜壁结构,这些结构对细菌的正常生理活动至关重要。但是,在工业领域中,这些非必需细胞膜壁结构不仅在合成过程中耗费大量的能源和底物,而且某些细胞膜壁结构还存在巨大的致病风险。本论文整理汇总了11种非必需细胞膜壁结构,分别是:菌毛、鞭毛、卷曲纤维、核心多糖、O-抗原、克拉酸、肠杆菌共同抗原、4型荚膜、纤维素、唾液酸和聚-β-1,6-N-乙酰葡萄糖胺。本研究从基因水平去除这些大分子结构,构建了一系列非必需细胞膜壁结构缺失的突变菌株。从生长、底物和能量节约、通透性和代谢物变化等角度,筛选有益于工业化生产的突变株,解析其全局调控机制,并将其应用于3-羟基丁酸酯(PHB)、L-苏氨酸、重组蛋白和克拉酸的生产。
创新要点
(1)去除非必需细胞膜壁结构影响大肠杆菌细胞生长和生产效率。 (2)删除CU菌毛合成的64个基因提高大肠杆菌PHB和L-苏氨酸生产效率。 (3)删除肠杆菌共同抗原和鞭毛合成的62个基因提高大肠杆菌生产效率。
主要技术指标
在实验室发酵罐水平,可拉酸产量达到19 g/L. 可拉酸固体成纸屑状;分子量为2.0×103~4.85×103 KDa;克拉酸具有三螺旋结构;在30~102 ℃内稳定,玻璃化转变温度、熔融温度和分解温度分别是123.5 ℃, 253.9 ℃,和 291.9 ℃;可拉酸在水溶液中为球形链构象,分子直径为222.7~286.4 nm;克拉酸水溶液是一种非牛顿流体,其粘度与浓度、剪切速率、盐、温度和pH相关,高浓度克拉酸兼具粘性和弹性。
其他说明
完成人信息
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